近日,分析化學學科TOP期刊Analytica Chemistry(IF = 6.986)發表我院劉麗芳、辛貴忠團隊關于一氧化氮質譜探針檢測方法的研究成果(https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01259)。博士研究生鐘竺君為第一作者,劉麗芳教授和辛貴忠副教授為共同通訊作者,中國藥科大學為第一作者單位。
一氧化氮(Nitric oxide, NO)是一種重要的生理分子,其功能取決于其在生物系統特别是細胞中的濃度。以濃度為基礎的細胞内NO分析可以為探索其在健康和疾病中的确切作用提供線索。然而,現有的檢測細胞内NO的方法仍不足以進行定量分析。
由于NO半衰期短、反應活性高,質譜法對其準确分析具有挑戰性。合理的方法是開發一種合适的分子探針,該探針需要具備幾個特質,例如可與NO快速反應;反應生成穩定的産物;産物具有獨特的質譜響應,不易受到生物基質的幹擾。基于以上,本研究報道了一種定量質譜探針方法來測量細胞中NO水平。該探針氨氯地平(AML)包含一個漢斯酯,與NO反應形成吡啶,産生脫氫氨氯地平(DAM)。通過超高效液相色譜-串聯質譜(UPLC-MS/MS)對DAM進行定量,可以對細胞内NO的水平進行準确測量。
通過對細胞直接AML處理或給細胞加入外源NO供體如硝普鈉,證明了基于該質譜探針的方法能夠測量細胞内的内源性和外源性NO。因此,以AML為探針開發的UPLC−MS/MS定量方法有望成為一種分析細胞内NO的新方法。
雖然該方法的開發是為了評估細胞内NO水平,但未來的研究可能會将其應用範圍從培養細胞擴展到完整的生物體。受到呼出氣溶膠的基于質譜的分析啟發,将該質譜探針方法與固相微萃取(SPME)技術相結合可能有助于研究人類和動物呼出的NO。
綜上所述,本研究提出AML可以作為一種外源性分子探針,将NO變為易于識别的分子,并通過基于質譜的方法進行準确定量。
(撰寫人:生藥系 辛貴忠)
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